Vol.42，No.10 (2014)
- 表題：
- MTT法によるアカントアメーバ消毒効果の定量的評価法（原著論文）
- 著者：
- 縄瀬寛之（（株）シード 開発部）
- 掲載：
- 日本防菌防黴学会誌，Vol.42，No.10，pp.527−532（2014）
分析装置としてHPLCを用いたMTT法によるアカントアメーバ消毒評価法を提案する。アカントアメーバを1/4リンゲル液に懸濁した液を被験試料に接種し，25±0.2℃下で4時間の消毒処理を施した。中和後，培養液にて段階希釈し，各濃度の希釈液を48ウェルカルチャープレートに播種後，4日間（96±2時間）培養した。培養後のアカントアメーバをMTTと反応させMTT-formazanを産生させた。産生させたMTT-formazanはスピンフィルターに回収し，遠心濾過により精製後，メタノールにて抽出した。抽出した試料をHPLCにて検出し，各アカントアメーバ濃度とMTT-formazan面積値から検量線を作成した。得られた検量線は，R2＞0.99の良好な検量線であったことから，MTT-formazan面積値から各被験試料のアカントアメーバ生存濃度を算出し，アカントアメーバ減少濃度を求めた。繰り返し評価した結果（N=6），高い再現性を示しており，スピンフィルターによるMTT-formazanの精製・抽出および，HPLCによる検出は試験者の主観を伴わずアカントアメーバに対する消毒効果を定量的に評価できる方法と考えられた。
- Key words：
- Acanthameoba（アカントアメーバ）/MTT assay（MTT法）/PHMB/Quantitative inactivation evaluation（消毒効果の定量評価）．
